脐血干细胞移植治疗肝硬化的疗效
陈海鸥 胡小宣 刘洪娟 钱林
湖南省人民医院肝病内科
有核细胞处理试剂盒
中航生物研制的“有核细胞处理试剂盒”是国内最早拥有自主知识产权的干细胞分离提取原研产品。拥有国家CFDA注册的二类医疗器械注册证,专门用于从人骨髓血、外周血、脐带血中分离、纯化出成体干细胞。目前已应运于临床超过40000例,为传统治疗无法治愈的疾病提供了一个全新的治疗手段——细胞治疗。 为患者解除病痛、提高生存质量、延长寿命提供了一个机会,获得广大患者、医学专家的欢迎和一致好评!
【摘要】
目的
观察脐血干细胞移植治疗失代偿期肝硬化患者的临床疗效。
方法
失代偿期肝硬化患者34例,其中乙型或丙型肝炎肝硬化22例,乙型肝炎与酒精性混合性肝硬化3例,酒精性肝硬化4例,胆汁性肝硬化4例,肝豆状 核变性所致肝硬化1例;Child-Pugh分级:A级3例,B级21例,C级W例。
所有患者术前均行肝功能及影像学等检查,无菌采取脐血并分离出干细胞,经肝动脉将干细胞悬液移植入肝脏,分别在移植后第1周、1个月、3个月、6个月复查肝 功能,观察实验室指标、临床症状及不良反应情况。
结果
干细胞移植术后大部分患者症状明显改善;术后6个月ALT由均值56.9 U/L降至46.3U/L,TBil 由 47.3umol/L降至24.6umol/L,Alb 由30.9 g/L上升至35.5g/L,PT由17.9s降至16.4s;术后复查B超仅1例患者腹水增多,15例腹水明显减少,9例腹水消失;34例患者未发现严重不良反应及并发症。
结论
脐血干细胞移植安全可行,可不同程度改善肝硬化患者临床症状、肝功能和凝血功能。
【关键词】 脐血;干细胞移植;肝硬化
肝硬化是各种慢性肝病的终末期表现,是临床治疗的一大难题,对其治疗方法的研究一直处于不断的研究探索之中。肝移植能够从根本上改善肝功能、延长肝硬化患者的生存期,己成为理想的治疗选择,然而由于其治疗费用昂贵、供体器官紧缺以及移植后的并发症等方面的问题,使临床应用受到很大限制。
因此寻求一种经济可行、又无供求限制的新方法,已成 为广大学者的研究方向。目前自体骨髓干细胞移植治疗肝硬化已取得一定进展,而脐血干细胞较骨髓干细胞更具有优势。我科对失代偿期肝硬化患者进行脐血干细胞移植治疗,取得了一定的疗效,现报道如下。
资料与方法
一、一般资料
2008年12月至2009年8月期间收治的34例失代偿期肝硬化患者,其中男性27例,女性7例,年龄 18-69岁,平均年龄49岁;22例为乙型肝炎后肝硬 化,3例为乙型肝炎与酒精性混合性肝硬化,4例为酒 精性肝硬化,4例为胆汁性肝硬化,1例为肝豆状核变 性所致肝硬化;Child-Pugh分级:A级3例,B级21 例,C级1。例。术前均行腹部B超和(或)CT检查, 25例并发腹水。实验室检査包括血清ALT、TBil、 Alb、凝血酶原时间(PT)。所有病例均行内科综合治疗,患者在知情同意情况下签定《知情同意书》。
二、脐血干细胞釆集
选择健康产妇,排除乙型肝炎、丙型肝炎、艾滋病、梅毒以及其他传染性疾病,无病理妊娠。胎儿娩出并断脐后,消毒采血部位,用装有ACD-B保存液的一次性采血袋以封闭式釆血法釆血,每袋釆脐血约 100-140 mL备用。
三、脐血干细胞分离
用负收集法分离提取脐带血干细胞,试剂盒由【中航(宁夏)生物股份有限公司】提供。严格按照操作步 骤进行分离提取,每例提取的脐带血干细胞总数为1.6~7.3×10*7,以生理盐水稀释到5ml,立即进行干细胞移植。
四、移植方法
经股动脉穿刺插管,先行选择性肝固有动脉造影,排除肝癌后,将含有脐带血干细胞的生理盐水经导管按脉冲式方法从肝固有动脉缓慢注入。
五、疗效观察
术后住院期间及出院后的观察期所选择的病例均未使用保肝药物及输注人血白蛋白等,术后观察患者临床症状、体征和不良反应;术后1周、1个月、3个 月和6个月复查肝功能、PT和腹部B超。
六、数据分析
数据以均数±标准差表示,釆用配对t检验,所有数据釆用SPSS13. 0软件进行分析处理。
结果
一、脐血干细胞移植后患者身体状况的改善情况
移植后1周,34例患者食欲改善32例,体力好转29例,腹胀减轻28例。
二、脐血干细胞移植后生化指标的改变情况
血清Alb在术后1周有所下降,术后1个月开始逐渐上升,术后6个月升高明显,但差异无统计学意义(P = 0.108);血清ALT在术后逐渐降低,但差异无统计学意义;血清TBil在术后1周和1个月较术前有所上升,于术后3个月开始逐渐下降,术后6个月下降明显(P = 0.017);PT术后均有不同程度改善,但与术前比较差异无统计学意义(见表1)。
与术前比较,*P<0.05
三、脐血干细胞移植后B超检查腹水情况
25例并发腹水患者,术后1周患者腹水减轻不明显;术后6个月仅1例患者腹水增多,15例腹水明显减少,9例腹水消失。
四、脐血干细胞移植后不良反应的发生情况
34例患者未见发热、白细胞下降、肝区疼痛等不良反应和并发症。
讨论
现已证明干细胞在体内外均有极强的向肝系细胞分化的能力(1-3),通过移植具有分化增殖能力的干细胞,使其在体内分化成肝细胞,可以代偿部分肝功能, 因此干细胞移植在肝脏疾病中的应用倍受重视。近年来有关干细胞在肝硬化中的研究越来越多,研究证实,在小鼠肝硬化模型中,移植的骨髓干细胞能分化成肝细胞并表达Alb和CK8,说明干细胞在肝硬化环境中能够增殖分化⑷。随着干细胞在肝硬化动物模型中研究的进展,我国北京军区总医院张强等⑸经肝动脉骨髓干细胞移植及中山大学附三院曹葆强等⑹ 经门静脉骨髓干细胞移植治疗肝硬化的临床应用均 获得了一定的近期疗效。
近年来脐带血作为造血干细胞的另一个来源受到广泛关注,脐血中可移植干细胞比例明显高于成人骨髓及外周血⑺,且与骨髓干细胞相比,脐血干细胞自我繁殖能力强、繁殖速度快。研究证实脐血干细胞可以分化为肝细胞「旳,将脐血干细胞输入急性肝损伤大鼠,可在鼠肝脏内检测到人AFP和Alb表达及检测到人的X染色体DNA[9],说明脐血干细胞能在损伤的肝脏中增殖分化成为肝细胞。
我们于2008年12月至2009年8月采用脐血干细胞经肝动脉途径移植,对34例失代偿期肝硬化患者进行治疗发现,移植后患者血清ALT和TBil逐渐 下降,Alb上升,PT改善,表明脐血干细胞移植治疗 后,患者肝功能明显改善,这些变化特别是血清Alb 的升高是一般护肝治疗不可能达到的。移植后血清 ALT逐渐下降,但差异无统计学意义,考虑可能与肝 硬化患者治疗前ALT升高不明显或在正常范围有 关,加大样本量可能会有更好的比较价值;血清Alb 在移植后1周时均有所下降,1个月后上升,1周时下降的原因不明确,推测是否与疾病进展和内科治疗的 放松(移植后未输血浆和Alb)及介入手术打击有关, 有待更多的证据证实。血清Alb在术后6个月升高明显,虽差异无统计学意义,但从临床的角度来说效 果还是很明显的,相信随着病例数的扩大可能会得到更理想的结果。血清TBil于移植后6个月时与术前比较差异有统计学意义,表明脐血干细胞移植能降低TBil水平。
另外,我们还观察到移植后大多数患者的 临床症状明显改善,腹水逐渐减少或消失,且34例移 植患者中未发现严重不良反应及并发症。故我们认为脐血干细胞移植安全可行,可不同程度改善肝硬化 患者临床症状及肝功能、凝血功能。
目前经肝动脉脐血干细胞移植仅是作为治疗肝硬化的一种新的治疗方法加以探索,由于开展此项工作不久,病例数量尚少,随访时间不长,虽然近期取得了一定效果,其远期疗效如何尚需观察,对于脐血干细胞移植治疗肝硬化总的疗效评价还需大样本和严格的对照研究。